1,Principio e Campo di applicazione
Caricare il mezzo di coltura selettiva del sale biliare del lattosio e il reagente cromogenico TTC sulla carta, e quelli che possono crescere e fermentare il lattosio per produrre acido sulla carta dopo la coltivazione sono considerati positivi per i batteri coliformi. Registrare il numero di fogli positivi dei batteri coliformi ad ogni diluizione e trovare il numero corrispondente dei batteri coliformi in base alla tabella MPN dei batteri coliformi. Il metodo cartaceo per testare i batteri coliformi alimentari corrisponde al metodo a nove tubi del metodo standard nazionale, semplificando in un unico passaggio le fasi precedenti dell'esperimento e riducendo il tempo da 78 ore a meno di 24 ore. Ciò elimina molti lavori ausiliari come la preparazione dei mezzi di coltura, la disinfezione e la pulizia dei recipienti di coltura e consente di campionare e testare in qualsiasi momento aprendo l'imballaggio. Standard di esecuzione: Standard nazionale di sicurezza alimentare - Ispezione microbica degli alimenti - Metodo di conteggio MPN per batteri coliformi (GB 4789.3).
2,Metodo di funzionamento
1. elaborazione del campione: Pesare 25g (o 25mL) del campione secondo procedure asettiche e metterlo in una bottiglia di campionamento o tazza di omogeneizzazione contenente 225ml di diluente tampone fosfato sterile (o salina fisiologica). Agitare accuratamente per rendere omogeneo un campione 1:10. Il valore pH della soluzione del campione deve essere compreso tra 6,5 e 7,5 e aggiustato con 1 ml/L di idrossido di sodio o 1 ml/L di acido cloridrico, se necessario. Utilizzare una pipetta sterilizzata da 1mL per disegnare un omogeneo del campione 1:10, iniettarlo in una provetta contenente 9mL di diluente, agitare la provetta per rendere omogeneo il campione 1:100. Sulla base della stima della contaminazione del campione, seguire i passaggi di cui sopra per preparare una serie di omogeneizzati diluiti 10 volte contemporaneamente. Per ogni diluizione incrementale, sostituire una pipetta o una punta sterile da 1mL. L'intero processo, dalla preparazione dell'omogeneo del campione al completamento dell'inoculazione del campione, non deve superare i 15 minuti.
2. Vaccinazione
2.1. Selezionare due diluizioni per l'inoculazione. Gli alimenti ordinari utilizzano generalmente due diluizioni di 1:10 e 1:100, mentre le bevande utilizzano due diluizioni della soluzione originale e 1:10. Ogni porzione di questo prodotto è composta da tre grandi pezzi di carta (10mL ciascuno, con due impilati nella borsa come un pezzo grande) e sei piccoli pezzi di carta (1mL ciascuno).
2.2. Utilizzare una pipetta sterilizzata per estrarre 10 ml di miscela del campione 1:10 e aggiungerlo in un sacchetto di plastica contenente grandi fogli di carta (equivalente a 1 g di campione). Dopo l'aspirazione, posizionarlo piano e ripetere tre volte. Quindi utilizzare una pipetta sterilizzata da 1mL per estrarre 1mL della stessa diluizione della miscela del campione e aggiungerlo in un sacchetto di plastica contenente piccoli fogli di carta (equivalenti a 0,1g del campione), e ripetere tre volte. Prendere un'altra pipetta sterilizzata da 1mL e aggiungere 1mL di miscela del campione 1:100 in un sacchetto di plastica contenente piccoli fogli di carta (equivalenti a 0,01 g di campione), ripetere tre volte.
3. Coltivazione: Posizionare i fogli di carta inoculati (impilabili) in un incubatore 36 ℃± 1 ℃ e incubare per 15-24 ore.
3,Rapporto sul numero più probabile (MPN) di batteri coliformi
1. Se la carta diventa gialla o mostra macchie rosse su uno sfondo giallo, è un documento positivo per Escherichia coli. La carta rimane invariata nel colore blu viola o presenta macchie rosse su uno sfondo blu viola, ma non c'è giallo intorno ad essa, tutti negativi per i batteri coliformi.
2. Registrare il numero di strisce di carta positive per ogni diluizione di batteri coliformi e trovare il numero corrispondente di batteri coliformi secondo la "Tabella MPN per batteri coliformi in alimenti e bevande".
3. Se il primo gradiente della vaccinazione è la soluzione originale, i risultati trovati sulla tabella devono essere divisi per 10.
4,Precauzioni
L'unità utilizzata nel nuovo standard nazionale è stata modificata con il numero più probabile di coliformi per grammo (o millilitro) di campione, e la dose standard di inoculazione è di 0,333g (mL). La quantità standard di inoculazione per l'uso di questo prodotto è di 3,33 g (mL), e l'inoculazione di 10 ml di omogeneo del campione 1:10 su una carta grande equivale a 1 g di campione. Pertanto, i numeri nella tabella devono essere ridotti di 10 volte di conseguenza. La quantità di inoculazione del campione della bevanda è 33.3mL e 10mL della soluzione del campione dovrebbe essere inoculato su una carta grande. I numeri nella tabella dovrebbero essere ridotti di 100 volte.
5,Salva condizioni
Questo prodotto deve essere conservato in frigorifero a 4 ℃ a 10 ℃ con una durata di un anno. Dopo aver aperto il sacchetto di alluminio foglio, qualsiasi carta inutilizzata deve essere rimessa nel sacchetto di alluminio foglio, sigillato e messo in frigorifero. Dovrebbe essere utilizzato entro un mese. La condensa può verificarsi in ambienti ad alta umidità, è meglio riscaldare l'intero pacchetto a temperatura ambiente prima dell'apertura.

Clicca per vedere: Tabella di recupero coliformi alimentari e bevande (MPN)